在醫(yī)學領域中高、超速離心機主要用于分離細胞、細胞器,純化和收集病毒、RNA、DNA、質(zhì)粒和蛋白質(zhì)等生物大分子。
一、分類:低速離心機(6000r/min以下):細胞、細胞核分離高速離心機(25000r/min以下):細胞、細胞器超速離心機(25000r/min以上):病毒、核糖體、核酸、蛋白
二、組成離心機主要有驅動電機、制冷系統(tǒng)、真空系統(tǒng)(超離必有)、顯示系統(tǒng)、自動保護系統(tǒng)和控制系統(tǒng)組成。必要的配件為離心轉頭和離心管。
三、離心轉頭的選用在離心中最常使用的轉頭是角度頭和水平頭。1. 角度頭常用于差速離心來分離s(沉降系數(shù))值相差較大(1:10)的樣品。2. 水平頭常用于密度梯度或等密度離心。3. 另有一種垂直轉頭使用較少,此轉頭主要用于等密度離心,以縮短離心時間。
四、離心管的選用
1. 玻璃離心管絕對不能在高、超速離心機上使用。
2. PA管:化學性能穩(wěn)定,半透明,能耐高溫消毒。
3. PP管:化學性能穩(wěn)定,半透明,能耐高溫消毒。用過氧乙酸消毒時間久后會產(chǎn)生裂紋。
4. PC管:透明度好,硬度大,能耐高溫消毒。但不耐強酸強堿及某些有機溶劑。主要用于5萬(轉/分)以上離心。
5. CN管:質(zhì)地較軟,透明,但不耐強酸強堿及某些有機溶劑,不能高壓消毒。適合于蔗糖、甘油等密度梯度離心。應透明,利于收集。
五、注意事項
1、對稱平衡:當離心轉速達1-5萬(轉/分)時,如對稱管相差1克,轉頭半徑5厘米,則 離心力公式 F=m×RCF 查表得:1萬(轉/分)→ RCF=6000 → 代入公式 → F=1×6000=6(公斤) 5萬(轉/分)→ RCF=150000 → 代入公式 → F=1×150000=150(公斤)
此時引起兩邊不平衡可達6-150(公斤),這對離心機的損傷是很大的,至少將縮短離心機的使用壽命。
2、如離心管蓋子密封性差液體就不能加滿(針對高速離心且使用角度頭),以防外溢。外溢后果:失去平衡;污染轉頭和離心腔;影響感應器正常工作。
3、超速離心時,液體一定要加滿離心管,應超離時需抽真空,只有加滿才能避免離心管變形。
4、使用角度頭時別忘蓋轉頭蓋,如未蓋,離心腔內(nèi)會產(chǎn)生很大的渦流阻力和摩擦升溫,這等于給離心機的電機和制冷機增加了額外負擔,影響離心機的使用壽命。