在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中高、超速離心機(jī)主要用于分離細(xì)胞、細(xì)胞器,純化和收集病毒、RNA、DNA、質(zhì)粒和蛋白質(zhì)等生物大分子。
一、分類(lèi):低速離心機(jī)(6000r/min以下):細(xì)胞、細(xì)胞核分離高速離心機(jī)(25000r/min以下):細(xì)胞、細(xì)胞器超速離心機(jī)(25000r/min以上):病毒、核糖體、核酸、蛋白
二、組成離心機(jī)主要有驅(qū)動(dòng)電機(jī)、制冷系統(tǒng)、真空系統(tǒng)(超離必有)、顯示系統(tǒng)、自動(dòng)保護(hù)系統(tǒng)和控制系統(tǒng)組成。必要的配件為離心轉(zhuǎn)頭和離心管。
三、離心轉(zhuǎn)頭的選用在離心中最常使用的轉(zhuǎn)頭是角度頭和水平頭。1. 角度頭常用于差速離心來(lái)分離s(沉降系數(shù))值相差較大(1:10)的樣品。2. 水平頭常用于密度梯度或等密度離心。3. 另有一種垂直轉(zhuǎn)頭使用較少,此轉(zhuǎn)頭主要用于等密度離心,以縮短離心時(shí)間。
四、離心管的選用
1. 玻璃離心管絕對(duì)不能在高、超速離心機(jī)上使用。
2. PA管:化學(xué)性能穩(wěn)定,半透明,能耐高溫消毒。
3. PP管:化學(xué)性能穩(wěn)定,半透明,能耐高溫消毒。用過(guò)氧乙酸消毒時(shí)間久后會(huì)產(chǎn)生裂紋。
4. PC管:透明度好,硬度大,能耐高溫消毒。但不耐強(qiáng)酸強(qiáng)堿及某些有機(jī)溶劑。主要用于5萬(wàn)(轉(zhuǎn)/分)以上離心。
5. CN管:質(zhì)地較軟,透明,但不耐強(qiáng)酸強(qiáng)堿及某些有機(jī)溶劑,不能高壓消毒。適合于蔗糖、甘油等密度梯度離心。應(yīng)透明,利于收集。
五、注意事項(xiàng)
1、對(duì)稱(chēng)平衡:當(dāng)離心轉(zhuǎn)速達(dá)1-5萬(wàn)(轉(zhuǎn)/分)時(shí),如對(duì)稱(chēng)管相差1克,轉(zhuǎn)頭半徑5厘米,則 離心力公式 F=m×RCF 查表得:1萬(wàn)(轉(zhuǎn)/分)→ RCF=6000 → 代入公式 → F=1×6000=6(公斤) 5萬(wàn)(轉(zhuǎn)/分)→ RCF=150000 → 代入公式 → F=1×150000=150(公斤)
此時(shí)引起兩邊不平衡可達(dá)6-150(公斤),這對(duì)離心機(jī)的損傷是很大的,至少將縮短離心機(jī)的使用壽命。
2、如離心管蓋子密封性差液體就不能加滿(mǎn)(針對(duì)高速離心且使用角度頭),以防外溢。外溢后果:失去平衡;污染轉(zhuǎn)頭和離心腔;影響感應(yīng)器正常工作。
3、超速離心時(shí),液體一定要加滿(mǎn)離心管,應(yīng)超離時(shí)需抽真空,只有加滿(mǎn)才能避免離心管變形。
4、使用角度頭時(shí)別忘蓋轉(zhuǎn)頭蓋,如未蓋,離心腔內(nèi)會(huì)產(chǎn)生很大的渦流阻力和摩擦升溫,這等于給離心機(jī)的電機(jī)和制冷機(jī)增加了額外負(fù)擔(dān),影響離心機(jī)的使用壽命。